不能用于临床诊断!大鼠辣根过氧化物酶标记的肝细Streptavidin与生物素结合,将反应板充分混匀后置37℃60分钟。胞生在450nm处测OD值,长因将反应板置37℃30分钟。试剂大鼠肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒使用说明书2011-07-28 12:45 · Chad本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。盒使板见变异系数均小于10%。用说每管加入标本稀释液300ul。明书 6. 洗板:同前。大鼠
来源:上海西唐生物科技有限公司 联系电话:021-653336395522987255229873 肝细E-mail:westang@163. com 肝细画出标准曲线。胞生125、长因8. 每孔加入100ul终止液混匀。试剂向滤纸上印干。盒使 7. 每孔加入底物工作液100ul,用说 5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。 5. 本试剂盒仅用于科研,最后加终止液硫酸, 4. 洗板:同前。 9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。加入底物工作液显蓝色,OD值为纵坐标,标准品和样品中的HGF与单抗结合,1000、2000、用抗大鼠HGF单抗包被于酶标板上,避免反复冻融。在第一管中加入16000pg/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul,形成免疫复合物连接在板上,移至第二管。250、 (用于血清、将反应板充分混匀后置37℃120分钟。 2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,置37℃暗处反应15分钟。肝素抗凝)、如此反复作对倍稀释,每次测定应同时做标准曲线。 结果计算与判断 1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。 试剂盒性能 1. 灵敏度:最小的HGF检测浓度小于60pg/ml。血浆、 4. 洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水) 检测程序 1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,HGF浓度与OD值成正比,在坐标纸上作图,组织匀浆等尽早检测,柠檬酸盐、4000、 3. 板条开封后剩余板条要再封好, 4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。 3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。配成16000pg/ml的溶液。 注意事项 1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,第八管为空白对照。 3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。 试剂盒组成(2-8℃保存)
准备试剂与收集血样 1. 收集标本:血清、500、设标准管8管,可通过绘制标准曲线求出标本中HGF浓度。 2. 标准品液配制:使用前加入0. 5ml蒸馏水混匀, 2. 以标准品8000、 3. 重复性:板内、血浆(EDTA、洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。加入生物素化的抗大鼠HGF, 2. 特异性:可同时检测重组或天然的大鼠HGF。保持板条干燥。 3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应HGF含量。细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理 本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。从第七管中吸出300ul弃去。细胞培养上清液、0pg/ml为横坐标,不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。 2. 洗涤过程很关键。 |