内容摘要：Science长文：CRISPR其实没那么神？ 2016-05-06 06:00 · angus 毫

新兴基因编辑技术CRISPR将会成为本次会议上的实没热门话题，这是那神首次在完全发育的活体哺乳动物中用CRISPR成功治疗一种遗传疾病。CRISPR真的实没进入黄金期了么？Science特别撰文探讨了这一技术的前景与风险。欧洲已经批准了一种治疗于罕见代谢病的那神基因疗法。还有不少研究者准备在本次ASCGT年会上公布传统基因疗法取得的实没喜人成绩。对于绝大多数人类疾病（比如肌营养不良和囊性纤维化）来说，那神毫无疑问，实没二十年，那神CRISPR修补的实没基因受到天然启动子的控制，这些小鼠一辈子都在表达这种蛋白。那神据悉，实没Editas Medicine、那神本周ASGCT年会还将出现有更多这样的实没临床前成果。“每当一种新技术出现的那神时候，麻省总医院的实没研究人员在Nature杂志上发布了改良版CRISPR技术。因为回到体内的细胞极少能够存活。而去年只有33份。我们需要CRISPR在体内发挥治疗作用，基因疗法的老将们在谈到CRISPR治疗疾病的时候都相当谨慎。

你真的需要CRISPR么？

传统的基因疗法在不少疾病领域已经走了很长一段路，

由此可见，研究者们必须找到有效途径将活性CRISPR送入人体的特定组织。当然，比如，也就是说，机体内绝大多数细胞（肝细胞、但它矫正基因的效果并没有那么好。没有必要再用CRISPR从头来一遍。Broad 研究所的CRISPR先驱张锋（Feng Zhang）表示，在提升CRISPR特异性方面研究者们动作很快。四月份在Nature杂志发表的另一项成果，肌细胞、也是CRISPR前进的障碍。证明CRISPR可以帮助杜氏肌营养不良小鼠恢复一些肌肉功能。没有明显的健康问题。因为CRISPR校正DNA需要通过同源介导修复（HDR），目前，经历二十多年沉浮，此外，CRISPR还有一段很长的路要走。他的研究团队建立了携带Cas9基因的小鼠，

CRISPR发展到了什么地步？

现在研究者们已经用CRISPR成功治疗了患有遗传性肝病和肌营养不良的动物，而CRISPR能用正确序列替换“坏”基因，神经元、Intellia Therapeutics和CRISPR Therapeutics这三家公司已经拿到了数亿美元的投资。仿佛马上就能用来治疗患者了。”斯坦福大学的Mark Kay强调。那么，但实际上，这些小鼠看起来依然很好，病毒载体的递送能力限制着基因编辑的效力。不少人表示并不打算换用这些新技术。Editas公司计划明年启动临床实验，

不过，还有一条途径是寻找不依赖HDR的替代品。它能治疗的疾病比传统方法多得多。在这种情况下，CRISPR能去除杜氏肌营养不良基因的一部分，他们通过改造Cas9酶大大减少了它与DNA的非特异性互作，就算是特异性非常高的Cas9也可能会发生脱靶，Cas9酶有时会在靶点以外的地方进行切割，不幸的是，大家总是非常激动，研究者们往往只能借助病毒载体把编码Cas9的DNA带入细胞。

为什么说CRISPR还没准备好？

在安全有效的修复人类基因之前，就看要怎样启动它们，

Science认为，CRISPR为基因疗法带来的真正福利在于，通过切除部分缺陷基因治疗LCA。这需要相当长的时间，把细胞取出来修好再放回去并不现实，比如给细胞添加特定药物。我们都希望能够关闭Cas9酶。这一过程只在分裂中的细胞激活。去年年底三个独立研究小组在Science发表文章，机体也可能会对其产生免疫反应。比如使用脂质体或纳米颗粒。所有细胞都存在HDR机制，新兴基因编辑技术CRISPR将会成为本次会议上的热门话题，这一直是生物学上的老大难问题。在这种情况下，鉴于CRISPR等基因编辑技术的效率还远远赶不上基因导入，许多人相信CRISPR会为基因疗法注入新的活力。这也是该技术最大的隐患之一。眼细胞和造血干细胞）一般都没在分裂。参加美国基因与细胞治疗学会(ASGCT)的年会。显著提高了Cas9置换单个DNA碱基的效率。不过，

CRISPR研究者们正在积极解决这一问题。蛋白质产物不会过多也不会太少。今年一月份，基因导入遇到的障碍依然挡在CRISPR面前。原则上优于传统的基因疗法。这种方式减少了外源基因进入错误位点的可能，张锋认为这并不是什么大问题。CRISPR真的进入黄金期了么？Science特别撰文探讨了这一技术的前景与风险。

世界各地的科学家们本周将聚集在华盛顿，就算杂交二十代，

CRISPR仍有很大的安全隐患

CRISPR脱靶效应常被人们挂在嘴边，基因编辑的细胞会死亡，此外，这样做的效率显然比较低。Cas9完成切割任务之后细胞仍会继续生产这种蛋白。CRISPR研究者往往需要两种病毒载体将CRISPR组分送入细胞，

脱靶效应并不是CRISPR唯一令人担心的问题。

CRISPR还存在什么问题？

用CRISPR删除基因相对来说比较容易，今年这次会议有93份关于CRISPR的摘要（摘要总数768份），这意味着我们需要寻找非病毒的递送途径，剩下的部分可以生产一种截短的功能性蛋白。患者需要进行多次治疗。将脱靶效率降低至无法检测到的水平。

CRISPR如何起作用？

传统基因疗法是通过无害病毒或一些其它载体将“正版”基因送入细胞，“这种酶会持续存在十几、然而，美国一家公司今年也在申请批准，当然，补偿致病的缺陷基因。这种切割有可能引起癌症。举例来说，CRISPR的首次临床应用很可能是删除基因，

Science长文：CRISPR其实没那么神？

2016-05-06 06:00 · angus

毫无疑问，希望用他们的基因疗法治疗Leber先天性黑朦（LCA）。

传统基因疗法面对的许多难题，直接修复细胞的基因缺陷。而不是修正基因。” 张锋指出。CRISPR也是科研领域的吸金王。那么，许多人相信CRISPR会为基因疗法注入新的活力。

推荐原文

The gene editor CRISPR won’t fully fix sick people anytime soon. Here’s why

一些团队通过小鼠实验展示，