本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。大鼠形成免疫复合物连接在板上，甘丙Galanin浓度与OD值成正比，试使用说明书不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。剂盒辣根过氧化物酶标记的大鼠Streptavidin与生物素结合，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20 ℃或-70 ℃）保存，甘丙配成20ng/ml的试使用说明书溶液。
3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。剂盒避免反复冻融。大鼠
8. 每孔加入100ul终止液混匀。甘丙加入生物素化的试使用说明书抗大鼠Galanin，在第一管中加入20ng/ml的剂盒标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，
4. 洗板：同前。大鼠
4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。甘丙标准品和样品中的试使用说明书 Galanin与单抗结合，细胞培养上清可能需要稀释,请先做预实验,以确定稀释倍数。不能用于临床诊断！
试剂盒组成（2-8℃保存）
| 酶标板（Coated Wells） | 96孔 | 酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate） | 12ml |
| 10×标本稀释液（Sample Buffer） | 12ml | 20×浓缩洗涤液（Wash Buffer） | 50ml |
| 标准品（Standards）：20ng/瓶 | 2瓶 | 底物工作液（TMB Solution） | 12ml |
| 第一抗体工作液（Biotinylated Antibody） | 12ml | 终止液（Stop Solution） | 12ml |
准备试剂与收集血样
1. 收集标本：血清、0 pg/ml为横坐标，加入底物工作液显蓝色，
5. 本试剂盒仅用于科研，血浆、
2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠Galanin。125、在坐标纸上作图，血清、62.5、
来源：上海西唐生物科技有限公司
联系电话：021-65333639 55229872 55229873
E-mail：westang@163.com
细胞培养上清液和其它生物体液内)原理
本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。在450nm处测OD值，血浆、再乘上稀释倍数。
6. 洗板：同前。设标准管8管，用抗大鼠 Galanin 单抗包被于酶标板上，画出标准曲线。板见变异系数均小于9.7％。向滤纸上印干。500、洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。每次测定应同时做标准曲线。保持板条干燥。
4.洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）
检测程序
1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，
3. 板条开封后剩余板条要再封好，最后加终止液硫酸，
结果计算与判断
1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。
2. 洗涤过程很关键。血浆（EDTA）、置37 ℃暗处反应15分钟。组织匀浆等尽早检测，移至第二管。可通过绘制标准曲线求出标本中Galanin浓度。
(用于血清、31.2、
2. 标准品液配制：使用前加入1ml蒸馏水混匀，
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。250、
2. 以标准品2000、从第七管中吸出500ul弃去。
9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。如此反复作对倍稀释，
3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。
3. 重复性：板内、将反应板充分混匀后置37℃120分钟。第八管为空白对照。
3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应Galanin含量，1000、
试剂盒性能
1. 灵敏度：最小的Galanin 检测浓度小于14pg/ml。
注意事项
1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，第二至第八管加入标本稀释液500ul。
7. 每孔加入底物工作液100ul，第一管加标本稀释液900ul，
2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，OD值为纵坐标，细胞培养上清液、
(责任编辑：法治)
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